Human IL-1RA/IL-1F3 ELISA Kit检测试剂盒

规格 96 Test
灵敏度 0.09 pg/ml (50 μl);0.15 pg/ml (10 μl);
标准曲线范围 2.74~2000 pg/ml
标准曲线梯度 7点/3倍
孵育次数 2
可检测样本 可溶性物质的液相样品。例如:血清,血浆,细胞培养上清,组织研磨液等。
加样体积 50 μl/10 μl
类型 即用型
操作时长 120min
pg/ml O.D. Average Corrected
0.00 0.0625 0.0611 0.0618
2.74 0.0946 0.1014 0.0980 0.0362
8.23 0.1404 0.1366 0.1385 0.0767
24.69 0.2081 0.1979 0.2030 0.1412
74.07 0.3790 0.3737 0.3764 0.3146
222.22 0.9861 0.9935 0.9898 0.9280
666.67 2.1300 2.1710 2.1505 2.0887
2000.00 3.6470 3.7770 3.7120 3.6502

精度

Intra-assay Precision Inter-assay Precision
Sample Number S1 S2 S3 S1 S2 S3
22 22 22 6 6 6
Average(pg/ml) 37.9 190.5 584.1 42.1 208.8 611.7
Standard Deviation 2.8 12.1 37.9 1.9 14.5 41.6
Coefficient of Variation(%) 7.4 6.3 6.5 5.3 4.2 4.6

板内精密度:3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次,评估酶标板内的精密度。

板间精密度:3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次,评估酶标板间的精密度。

加标回收

健康人血清加入 3 个不同浓度水平的人 IL-1RA,未加人 IL-1RA 的血清作为本底,计算回收率。回收率的范围从 85 % 至 109 %,平均回收率为 98 %。

样本值

Sample Matrix Sample Evaluated Range (ng/ml) Detectable (%) Mean of Detectable (ng/ml)
Serum 30 6.34-126.18 100 33.78

应用本试剂盒,检测 30 个健康志愿者的血清样本,志愿者的用药史不详。n.d. = 测不到浓度值。样本的浓度值低于灵敏度被认为测不到浓度值。

背景: IL-1RA/IL-1F3

白介素-1受体拮抗剂(IL-1RA;也称为IL-1F3)是IL-1细胞因子家族的22-25 kDa成员。目前,有11个家庭成员(IL-1F1-F11),其中9个形成了人类CH2的IL-1基因簇。每个IL-1家族成员都包含一个IL-1折叠。该折叠是由12个包装的Beta -sheets生成的,它们相互作用以形成beta -trefoil结构。实现这种结构需要很少的氨基酸(AA)同源性,这解释了IL-1家族成员之间的低AA身份。 IL-1RA是一种纯细胞因子受体拮抗剂,没有信号转导发射活性。它是一种急性相蛋白,可抑制炎症。 IL-1(β)最初是由单核细胞响应多种刺激而产生的。然后,循环IL-1与广泛表达的I型I型受体(IL-1 RI)结合,并启动许多促炎事件。在内皮细胞(EC)上,IL-1诱导PGE2和IL-6释放,发烧,血小板病和肝急性相蛋白产生。在滑膜关节中,IL-1诱导软骨细胞不产生,这一事件导致胶原蛋白合成和软骨细胞凋亡减少。最后,IL-1在血液和组织中增加了中性粒细胞计数,因此能够促进多个位置的促炎环境。 IL-1RA通过竞争性抑制阻止IL-1行动。更正确地,尽管IL-1RA在IL-1 RI中填充了IL-1结合位点,但它也无法策划创建信号传递的IL-1 RI:IL-1 R辅助蛋白(IL-1 R ACP)异二聚体复合物。有效的IL-1RA浓度通常比局部IL-1浓度大100倍。这是因为IL-1RA半衰期只有6分钟,而IL-1型受体很少需要IL-1的IL-1受体才能引起细胞反应。

人IL-1RA合成为177 AA前体,其中包含25个AA信号序列和152 AA成熟区域。尽管它包含IL-1细胞因子折叠,但显然缺乏两个结构基序,可以激活IL-1受体异二聚体。首先,在与IL-1 RI结合后,ILE 51-HIS 54和LYS 145的存在排除了IL-1 R ACP的募集。其次,没有可识别的C末端凝集素段,可以假设有助于募集附件信号分量。成熟的人IL-1RA分别为77%和82%的AA与小鼠和犬IL-1RA相同,人类IL-1RA抑制了小鼠细胞的IL-1活性。许多细胞类型表达IL -1RA,包括单核细胞,Sertoli细胞,肝细胞,脂肪细胞,滑膜成纤维细胞,肥大细胞,胰腺β细胞和肠上皮细胞。至少有三个细胞内IL-1RA同工型(ICIL-1RA1、2和3)。所有均显示N末端变异,并且均包含分泌前体的35-177氨基酸。细胞内IL-1RA1特别感兴趣,因为据报道它被内皮细胞“分泌”,并以拮抗剂方式与IL-1 RI结合。细胞内IL-1RA1的长度为159 aa,显示了IL-1RA信号序列的第一个AA的3 aa取代。

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